IDENTIFICAREA BENZILOR OLIGOCLONALE


Identificarea benzilor oligoclonale in LCR se face prin doua metode:

  • electroforeza de inalta rezolutie asociata cu imunofixarea cu antiseruri marcate
  • focalizarea izoelectrica

        Electroforeza de inalta rezolutie asociata cu imunofixarea standard este o metoda simpla, specifica si sensibila, usor de interpretat. Evidentierea profilelor oligooclonale este facilitata, pentru cazurile dubioase, de posibilitatea utilizarii antiserurilor anti lanturi usoare K, L ce permite identificarea restrictiei de heterogenitate concomitent pentru Ig G, K si L. Identificarea benzilor oligoclonale prin aceasta tehnica are o valoare diagnostica mare (in special pentru diagnosticul precoce) conferita de prevalenta mare a benzilor oligoclonale, atat in cazul puseelor repetate, cat si la debut si de prezenta modelelor electroforetice specifice (distincte pentru scleroza multipla de debut sau in cazul puseelor repetate).


Focalizarea izoelectrica

        Tehnica permite cresterea sensibilitatii fata de tehnica anterioara prin marcarea antiserurilor utilizate pentru imunofixare cu peroxidaza. La fel ca la tehnica anterioara, se analizeaza cupluri ser/LCR, recoltate de la pacienti in acelasi timp, fara prealabila concentrare a LCR-ului.

        Dezvoltata in paralel cu tehnica anterioara, focalizarea izoelectrica tinde sa castige tot mai mult teren, mai ales dupa recomandarile facute in 1994 de Comitetul European de Studiu a Sclerozei Multiple privitor la tehnicile folosite la determinarea benzilor oligoclonale in LCR:

  • tehnica focalizarii izoelectrice este mult mai sensibila si specifica, cu un grad mare de rezolutie
  • Ig G oligoclonale trebuie determinate cu antiseruri specifice
  • confirmarea sintezei intratecale de Ig G se face prin analiza simultana a cuplurilor ser/LCR pentru studiul diferentelor dintre profilele electroforetice in ser si LCR
  • pentru o interpretare corecta, concentratia Ig G in ser si LCR trebuie sa fie identica
  • pe cat posibil, concentrarea LCR trebuie evitata

        Analiza se efectueaza in doua etape:

  • focalizarea izoelectrica pe gel de agaroza pentru separarea proteinelor in ser si LCR
  • imunofixarea cu antiseruri anti Ig G marcate enzimatic pentru evidetierea benzilor oligoclonale in LCR, prin studiul prezentei sau absentei diferentelor de distributie ale Ig G in cele doua fluide biologice

Interpretarea rezultatelor

Interpretarea corecta presupune:

  • analiza concomitenta a probelor de ser si LCR prelevate de la pacient in acelasi timp. Orice tratament al probelor care poate modifica concentratia imunoglobulinelor trebuie evitat
  • concetratia Ig in ser si LCR trebuie determinate cu precizie, astfel incat, dupa ajustarea acestora, probele sa contina cantitati egale de Ig de interes

Sinteza intratecala de Ig este indicata de urmatoarele observatii comparative:

  • modele diferite de imunofixare in ser si LCR
  • benzile ologloconale sunt prezente in multe dintre cazuri, dar nu in toate
  • orice banda intensa aditionala sau chiar o singura banda slaba observata pe modelul electroforetic in LCR, dar absenta in ser, constituie indicii pentru sinteza intratecala Ig
  • sinteza intratecala de Ig G este cea mai frecventa; cazurile de sinteza intratecala de Ig A sau Ig M sunt rare
  • sinteza intratecala de Ig A se manifesta, de obicei, prin profil Ig A mai catodic in LCR decat in ser

Noutati
























Actualitati Medicale




















 

Introdu adresa ta de email pentru a te alatura noua.

 
Proiect realizat de AB T&Co              © Toate drepturile rezervate Electroforeza.ro 2009